﻿838
NEUROLOGIE3418043010757101158205267310370429450493
PRO856804301074591154
PRAXI1031804301074591148201221
/12988043010731
Neurol.1374804301075593139165209227243
praxi.1633804301074672114152170186
2024;25(1)26-291836804301074487128168183227271293333350392434464502545
/24268043010732
www.neurologiepropraxi.cz460880430107651332012142633073553814284484965465656086586857327828098518919109269661005
281838026012657115
HLAVNÍ341207012670127198263336370
TÉMA733207012657114204274
Pokrok34136501063374110146186222
v579365010636
intravitální6313650106155688124166201218250287318360377
laboratorní102436501062970106147183225253292328370387
diagnostice14273650106375595132174214247280297332364
prionových18073650106326885126168208246285317358
onemocnění:218136501063880112167207242284315357374390
vysoce258636501063675107147183215
citlivá28163650106335083114132170207
a3038365010638
specifická30923650106316597131149179197232267309
detekce341736501063870103135171204236
prionů36693650106326885126168208
v3893365010636
mozkomíšním394536501065292124159198252269303344361415
moku437636501065192128169
pomocí456136501063273127168203220
RT‑QuIC47973650106346590131172189224
specificita340398101093792142186210240267311335368416
RT‑QuIC794398101095099126196250275332
je1163398101092372
zajištěna1273398101094089113137176210258312359
nutností16703981010952105138192246285318342
vysoké340412101094593132185230277
podobnosti6464121010953107162214269323376414447470
aminokyselinové11454121010945123147200253298347385434458481534587632680
sekvence1854412101093685130340426101094489141183229
rekombinantního597426101092976120170247300323374419470501553575628679
substrátu1304426101093686139176208239284315366
s16984261010936
priony1761426101095283106157209251
přítomnými340440101095283106137188265317360438460
ve828440101094490
tkáních946440101093073120171194236287
pacientů.1261440101095297140162209261292343363
Agregáty16524401010955107138185238283314360
jiných34045410109214392133172221
amyloid5784541010942117157180229250301
tvořících895454101092975123152174214235275324
proteinů1236454101095080128158202224273322
(tau,157445410109255397146165
alfa175545410109436491135
synuklein19064541010935783404681010950100144168214237288
atd.)646468101094374125145171
změnu8354681010939115162213264
tvaru1117468101093077122152203
rekombinantního1339468101092975119169245297320371415466497548570623674
prionového340482101095182105155207258301347398449
proteinu811482101095182132163209231282333
neindukují.1165482101095097119170222273316367390412432
Tyto1619482101094483117167
vlastnosti18074821010943661111471793404961010950101137169191
umožňují5544961010950126177216267317340362
detekci939496101095197129174218258280
prionů1242496101095182105156207257
v15224961010943
mozkomíšním15884961010975126165209258335357395340510101094970145
moku5025101010974123166216
a7355101010942
dalších794510101095093115150172212261
tkáních1072510101093072116166187227277
pacientů1366510101095094135156201251281330
za1713510101093883
jejich181251010109226789111151201
života,340524101093860105154184229249
krátce607524101094173118148188233
po8575241010951102
objevení9775241010949101123170213258309331
příznaků1325524101095182104143194238281331
onemocnění.16745241010949100146222272314340538101095096147169189
V5475381010950
případě615538101095181104156201253299
využití932538101094390141181203234256
mozkomíšního12055381010975126165208257334356394444466519570
moku17925381010975126169220
či340552101094163
stěru432552101093668115146199
čichové659552101094163106158210254301
sliznice98855210109365981122175197240286
se1302552101093684
dosahuje14145521010952104141188240291315362
často1804552101094187125157208
více340566101094366107153
než518566101095097137
95%680566101094692163
senzitivity868566101093683134174196227249294317348394
a12875661010944
téměř1356566101093075152198228
100%1609566101094790139212
specificity.184656610109368813534058010109406188112153174204249265
Vznikající622580101094988138159202246268289330351
agregovaný990580101094393123168220269312356406447
rekombinantní1454580101092974117166241292314364408457487537558
protein340594101095183133165210233284
navíc652594101095095138161203
není883594101095097149171
infekční1081594101092273100147191232283306
a14145941010944
tak1485594101093076119
se1632594101093683
snižuje1742594101093687110150201224271
i3406081010921
riziko37960810109295292114157207
profesionální604608101095182132159206243264315367411433484506
nákazy1128608101095094138183223270
pracovníků1416608101095182126168218261312333377427
v18596081010944
laboratoři.19196081010921653406221010951102132176205254284306325
Výjimečné683622101095194117138213259300350396
vlastnosti1098622101094365109144175225275311342363
RT‑QuIC1480622101094894119184234256309
vedly1808622101094388140161204
k3406361010942
jeho401636101092268119169
nedávnému589636101095095147191233284330406455
zařazení1063636101093984114158197242293314
do13966361010951101
nových15166361010950100143189229279
WHO18146361010976136198
diagnostických340650101095172116167218268304335356397440486526576
kritérií94265010109427495126171201223244
pro1212650101095181131
sporadickou1369650101093687138169213265286327370419469
CJN1864650101095288149
(Jankovska,340664101092558100149190237279314355398417
2021).771664101094690133174193209
K9956641010948
diagnóze1058664101095070112162211259296340
pravděpodobné1413664101095079122163212257307356407455506555599
CJN340678101095288148
tak513678101093075117
nově6556781010950100143188
stačí868678101093667111152173
přítomnost1066678101095181103133182258308358394425
neuropsychiatrického1516678101095096146175225277313356396446467340692101094373103124165207252302352
onemocnění7116921010950100146221271313363409459480
a12106921010944
pozitivní12736921010951102140161191212256307328
RT‑QuIC.1620692101094995119184235257310331
Dostupnost3407170014782151201244312383452520571614
prionového9817170014770114145213282350410471541609
RT‑QuIC3407310014768133165253322355426
v7947310014761
České8827310014771132182244305
republice12147310014743105176245316348379433494
Vyšetření480748101095094130175206235280331352
RT‑QuIC854748101094894119184235257309
není1185748101095096147168
v13757481010943
současné1440748101093585136176220256306352
době18147481010950100152198
dostupné3407621010950100135166215266316361
komerčně,717762101094190165210239279329374392
ale1124762101094365110
pouze12497621010951101151190234
v14997621010943
rámci1558762101092973147188208
probíhající1782762101095180129181202340776101095094115136177198
výzkumné561776101094489130173223298349394
studie979776101093566116167189234
na1236776101095094
našem1353776101095094129175250
pracovišti.1627776101095181125166214257279315345366385
Naše21403981010959103139184
laboratoř2347398101092165116167197241270319349
ve2719398101094388
spolupráci2829398101093687138160209261291335376397
s32483981010936
Národní33073981010959103132182234284305
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a25074261010944
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Jiřího296242610109345686108161212
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vzorku5233104101094485134164207257
do55121041010950100
prionové3940118101095181102152202252295339
laboratoře.4295118101092165116166196240270318348393411
Likvor4722118101094364106152201231
nesmí4969118101094995131206227
mít5212118101097596126
příměs5354118101095181102177223258
krve,3940132101094376124170189
proto4156132101095284135166217
není4399132101095299151173
vhodné4599132101094497149202254302
použít49271321010953105157198220251
jeho5205132101092370122174
první5406132101095283131184206
podíl,39401461010952104158180204224
což4190146101094191131
je4348146101092269
ale4443146101094567114
stejné4584146101093668114137188235
pravidlo,4846146101095283129172195248270321340
které5213146101094376123154200
platí5440146101095275120150172
pro3940160101095181131
vyšetřování4090160101094389125170201231280323367417438
přítomnosti4547160101095181103133182257308358393424445
proteinu5011160101095181131161205227277327
14-3-3.5357160101094687118163192237255
Mozkomíšní39401741010973124163207256333355393444465
mok44311741010976127171
se4628174101093682
do47371741010951102
transportu4865174101093060105156192244296326360410
uchovává53011741010950921431942372823940188101094490
v40571881010944
lednici4128188101092169122174196238260
a44151881010944
transport4486188101093161107159195248301332366
probíhá4879188101095283134188210264309
za5215188101093986
chladu.5328188101094192115160213264284
V39402021010952
případě4021202101095284107161207261308
nutnosti43582021010952103135188240277310332
je4719202101092371
možné48192021010977129169222270
mok51182021010977129174
zmrazit53212021010940118150196237260292
a39402161010945
uchovávat4012216101095193145197242288332378409
zmražený.44482161010939118149194235283335378394
Vzorky4869216101095292144175220267
se5163216101093785
vyšetřují5275216101094492130177209240292315338
v39402301010944
kvadruplikátu,4010230101094390135188218269322345366409455485536556
a45922301010944
to4662230101093181
jak4769230101092267110
neředěné,4905230101095197128174227274325372391
tak5322230101093076119
10×5467230101094790145
ředěné,3940244101093078132179232280300
aby4269244101094598143
se4441244101093785
eliminoval455524410109477092171193246298343389412
vliv499624410109456890136
případných5162244101095384107161207261313357398451
inhibitorů3940258101092274127149203226258309341393
RT‑QuIC4364258101095098124192245268323
reakce.4718258101093077123168209256276
Za5024258101095198
pozitivní51522581010953106146169201223269323345
se5528258101093684
považuje39402721010951102144188227277298344
vzorek,4300272101094384133163208251272
který4588272101094274119149194
dá4798272101095194
pozitivní49082721010951102139161191212255306327
reakci5251272101092974118160200221
minimálně54882721010974963940286101095071146190211261307
ve4265286101094488
243722861010946
jamkách4436286101092266141184228269319
ze4773286101093984
4.4876286101094665
Z49592861010950
doposud50272861010951101153204239289340
vyšetřených53862861010943891251702013940300101092975125166206256
524221300101094690
vzorků4336300101094384134164206257
mozkomíšního46173001010975125164206255331352389439460512562
moku52043001010975125168218
bylo5447300101095193115165
163940314101094688
RT‑QuIC4049314101094894118184234256309
pozitivních.43783141010952102140162192213257308329369419439
Z48373141010950
těchto4907314101093074116166195244
165171314101094789
pacientů5280314101095195136157203253283332
již394032810109224280
bylo4036328101095092113163
104214328101094687
neuropatologicky4317328101094994143172221272315344392414463513534574615660
verifikováno4993328101094286115137163186228275318361410459
a54673281010943
ve5526328101094386
všech3940342101094378123164214
případech4170342101095080101152196247292333382
byla4568342101095192114157
přítomnost4741342101095180101131180255304354389419
prionového5176342101095180102151201251293337387436
onemocnění39403561010951103151229281324376423475497
neuropatologicky4464356101095299151182233287333364415438490543565607651699
potvrzena.51903561010952105136184215257304357402423
Příklady3940370101094979102148172217271316
záznamu4283370101093986127180225303354
pozitivního46643701010953106145168199222267320342396448
a51393701010945
negativního521137010109519915219722825129634937139403841010950100
RT‑QuIC4060384101094995119185235257310
testu4390384101093075111142191
jsou4602384101092257107157
na4780384101095093
obrázku48943841010949101131175215257307
3.5222384101094664
Bohužel5307384101094999150199238283305
většina3940398101094388118155176226270
RT‑QuIC4232398101094995119185235257310
negativních4565398101095095147190220241285336357398447
případů5035398101095181103154199250299
nebyla5357398101095096148190212255
následně3940412101094992127147192243292336
nekropticky4292412101094994135166214265294315354395440
verifikována,4747412101094386116136163186227275317360409451470
tudíž5232412101092978128149187
v54344121010943
naší54924121010949923940426101093759
prospektivně4026426101095384136173226275319353376421474522
vyšetřené4575426101094492130177209240287340387
kohortě4989426101094495147199231265311
nejsme5327426101095299123160238285
schopni3940440101093676126175227277298
určit4254440101094979119139169
přesnou4439440101095181126162211261311
senzitivitu4766440101093581131170191221242285307337386
a51684401010943
specificitu5227440101093687133174195221245285306336386
s39404541010936
ohledem40024541010950101123169222268345
na4373454101095094
potenciální44934541010952104134179230272293338359410432
falešně495145410109267193139176226273
negativní5250454101095097149193223245289341362
případy.3940468101095181103154198250293308
Určitě4273468101095988128149179224
by4522468101095193
bylo4640468101095294116166
vhodné4831468101094394144196246292
všechny5148468101094379125166216266308
případy54814681010951811023940482101095196147191
vyšetřené4156482101094389125171202232277327373
RT‑QuIC4555482101094895119185235257310
následně4891482101095094129151197249299345
neuropatologicky52614821010950961461762262783223940496101093079101151203224265307353
analyzovat.4318496101094394137159202243293335380409429
Výsledky4772496101095094130152197249292338
prospektivní5135496101095181131167218264307340361405456477
studie3940510101093669120173195242
by4209510101095296
měly43325101010977124147191
posloužit45505101010952105142164216267308330362
jako4938510101092368112162
podklad51275101010952104158202226271324
pro5478510101095283134
jednání3940524101092268119170213263284
se4242524101093581
zdravotními4340524101093990119163206255285335356431452
pojišťovnami48105241010951101123145180211260303354397473494
a53215241010943
ministerstvem53825241010975961461672033940538101093075104141172218263338
pro4297538101095181131
získání444753810109386095138182233254
úhrady47205381010949100129173224268
vyšetření.5007538101094389125171201231276326347366
RT‑QuIC39405630014768133165253322355426
–43945630014760
budoucnost44815630014770139210278347401470539589632
laboratorní3940577001473192163232275337379446489559590
diagnostiky45575770014770101162231301369419462493554618
neurodegenerativních394059100147691312002433123834455165786487107548158578889501020105111051174
proteinopatií?39406050014770114182225286318387455526588630660692745
Metoda40806221010973119150200252296
RT‑QuIC4402622101094895120186237259312
představuje4740622101095182127180216247292334385407453
naději5219622101095094146192214236
pro5481622101095181131
výrazné3940636101094389120164203253299
zrychlení4261636101093868114154204225271321342
pravděpodobné4625636101095181125168218264315366418468520570616
diagnózy5263636101095071115166216266304349
prionového3940650101095181103153203253296341391441
onemocnění,44036501010949100146221271313363408459480499
a49246501010943
tím4989650101093051126
otevírá5137650101094979124167189219263
možnost5421650101097612616439406641010950101137168
pro4134664101095182132
budoucí42916641010952103155205256297318
aplikaci4635664101094496118139182227268289
v49506641010944
současnosti5020664101093586137178222258309359395427448
vyvíjených5494664101094390394067810109446689135186228268319
terapeutických4285678101093075105150202249299330352393435483524575
postupů.48886781010952104141173224277329349
Nicméně5264678101096083125202249301348
již394069210109224484
nyní4052692101095092144167
může42466921010975126166213
včasná4486692101094484130166218262
diagnóza4776692101095173118169221272311357
prionového5161692101095182105156208259303349400452
onemocnění39407061010951104153232285329382431484507
omezit44767061010951131179221245277
počet47827061010953107151198231
nadbytečných5042706101095197152206251286334378431475518571
vyšetření3940720101094288123168198227272322343
a42997201010942
umožnit43577201010949123172210259280310
rychlé4683720101092974113163184229
nasazení4928720101094992127171210254304325
paliativní5269720101095094115136179208229272322343
péče.3940734101095197138183202
To4159734101094488
ve4264734101094388
svém4369734101093580124200
důsledku4586734101095099135157203254297347
zvyšuje4950734101093884130166216238284
kvalitu5251734101094188132154175205255
života55237341010938603940748101094392122167
pacienta4124748101095196137158204255285329
i44717481010921
jeho4509748101092268119169
blízkých469574810109517395134177223263313
a50267481010943
vede5086748101094388140186
k52897481010942
úspoře5349748101094985136187217263
nákladů3940762101094993135158202253303
na4260762101094993
zdravotní4370762101093889118162205254284334355
péči.4742762101095197138160179
Sledování4938762101094465111163213256300350371
přítomnosti532676210109518110213318225739407761010950100136168189
prion4147776101095181104154205
konvertující4370776101094291142184229260293343366388429450
aktivity4838776101094386119141185207238284
u51397761010950
bezpříznaObr.52067761010951981381902202422823333773402428010057107138156
3.513242801004465
Záznam61824330954079112153193257
RT-QuIC8902433095387393148190207250
vyšetření11542433095346997131155177210252268
mozkomíšního1437243309563104135168207271288317358374416457
moku1908243309564104137178
pacientů210124330954081115131165207229270
na238524330954182
přítomnost24812433095406480103142206248288315339
prion28342433095406480121163
konvertující301124330953373114148181204230270286303337353
aktivity33792433095407398115149165189224
Negativní37034220954983124164188204238280296
výsledek6803422095346997113147188222255
(A),950342209521648597
pozitivní106134220954182113129152169203244261
výsledek13363422095346997113147188222255
(B).1606342209521597991
Vzorky171134220954070110133166201
jsou19273422095154282123
vyšetřovány20653422095336996130154177216250289331363
v2442342209534
kvadruplikátu249034220953369108149172213254271287320360383424
(sloupce).29283422095224763103145185219252272284
13226342209537
–3278342209540
pozitivní333234220954081112129152169203244261
kontrola3607342209533721143703522095234686103143
(mozkový52735220952283124155188227261297
homogenát83835220954182146186227262303344367
pacienta121935220954182115132166207230269
se150235220952862
sporadickou157835220952867108132170211227261294333375
CJN,196735220954373122136
typ21183522095235899
MM1),2232352209560120153169181
22428352209537
–2479352209540
negativní253435220954175116156180196230272288
kontrola283635220953373115137160200217257
(pufr),310735220952262103123147167179
33301352209537
–3352352209540
mok3406352209564104138
paci‑355835220954081115131156
enta3703622095347598137
(10×5213622095215588611362109748
ředěný),6733622095235697131172204224236
4924362209537
–975362209540
mok1029362209564104138
pacienta118136220954081115131166207230268
(neředěný),14643622095216095118151191225267299319331
51809362209537
–1861362209540
negativní191536220954176116157180196231272288
kontrola221836220953372114137160199216257
(pufr).248936220952162103123147166178
Reakce268136220953973114147180213
probíhala290836220954064103144161203244260301
po322336220954082
dobu331936220954081122163
60349636220953774
hodin358536220954181123139181
za37037220953171
teploty4553722095245798115155178213
5568337220953771
°C,7683722095246883
střídání865372209528517490131171213229
60110837220953775
s1197372209528
inkubace12393722095175891131172213247279
v1533372209533
klidu15813722095335066107148
s1743372209528
60178537220953774
s1874372209527
intenzivního19163722095165880113155186203237278295337377
třepání23083722095234679120161202219
(70025413722095215893131
RPM).268737220953977136156168
Pacient286937220953977111127161203225
B)310937220953858
je318237220951650
pozitivní324637220954182113129153169203245261
ve352137220953467
33603372209536
ze365437220953164
43733372209537
jamek37038220951656120154188
u572382209540
10×62738220953770699382109748
ředěného7613822095235697131172206248288
likvoru10643822095163366102141165206
a1284382209540
ve133938220953367
41420382209537
ze147138220953265
41550382209537
jamek160238220951556120154187
u1804382209540
likvoru18593822095163365102141165206
neředěného.20793822095417699132172206248282323364378
Obr.341627010057107138156
2.51462701004467
Princip620632095386077118152168208
vyšetření843632095336997130154177210251268
mozkomíšního112563209564104135168208272288317358374417457
moku159663209564104138179
pomocí17896320954081145186220237
RT-QuIC2040632095397494148190207250
na23056320954181
přítomnost2401632095406380103142206247288315339
prionů2754632095406480121162203
Malé371176109560101118152
množství537176109564105146177205229265281
vzorku83317610953366106129162203
moku1050176109564104138178
pacienta124317610954081115131165207229268
získaného15261761095314874106146187221263303
lumbální184417610951657121161202219260276
punkcí213517610954081122155188205
se235417610952861
přidá24301761095406379120160
k2605176109533
reakční26521761095235697130162203220
směsi288617610952890124152168
obsahující306817610954081108148190230246263297313
rekombi‑33961761095235689128192233250274
nantní37118610954182123146187203
prionový5891861095406380120162203236272
protein87518610954164103127159176217
(PrP)11071861095215981119138
a1259186109540
fluorescenční13141861095203979120143176204237270311345386402
indikátor17301861095175899115148188211250274
Thioflavin20181861095357894135155174214248265306
T.233918610953546
Destička239918610955085113137153186219259
s2672186109528
napipetovanými271418610954182122139180215238278311351392424488504
vzorky323318610953366106129162197
se344418610952862
inkubuje35201861095175891131172213229263
ve37119610953467
fluorescenčním4521961095213980120144177205238270312345386402466
spektrofotometru93219610952868103136161184223244284307347411445469492533
za147919610953271
pravidelného156519610954063102136152193227244285320361401
střídání1981196109528517490131171213229
inkubační22241961095175891132172213246287304
fáze25421961095206092125
a2681196109541
fáze27361961095216092125
intenzivního28751961095175881114155187203238279295338378
třepání.32681961095234679120161202218233
Ve351619610953971
vzor‑360119610953467106130151
ku37120610953374
přítomný4592061095406380103142206248279
patologický75320610954081104144161201242259292325360
prionový11282061095406380120162202236272
protein141420610954064103127159176217
(PrPSc)164620610952159811191764206605620401804206109521
mění184020610956397139155
konformaci200920610953373115135175198262302336352
rekombinantního23762061095235689128192233250291331373396437453495536
PrP29262061095386198
a3039206109540
vznikající309320610953467108125158197213230264280
agregáty338820610954081104137177218241276
PrP36792061095386098
váží37121610953473105121
Thioflavin5072161095357794134155173214248264306
T,82721610953546
který8872161095335891114150
po105121610954081
navázání114721610954181116155187227268285
produkuje144621610954064103144185218259275309
fluorescenci.17702161095203979120143176204237270312345361376
Třepání21612161095355992133174216232
rozlamuje24082161095236293110150214254270305
vznikající272721610953467108124157197213230264280
agregáty302121610954181104137178218242277
za331221610953271
vzniku339821610953366108124157198
no‑361021610954182107
vých37122610953469102143
agregačních52922610954081104137177218251292308342383
center92722610953366107130163186
a1127226109541
dochází118222610954081115156197229245
tak14422261095236295
k1551226109533
amplifikaci1599226109540103144161178198215248288321338
signálu.19512261095284384125166182223238
PrPSc36577109743691124777760572345
Vzorek6468170974579124151191230
Rekombinantní47610170853874108146206246264303338378401441458
PrP9491017085376098
Thioflavin5831223085357592132153172207240258297
T895122308535
inkubace,12701022085165690129170205237272287
55˚C,1572102208536711642102308321166210220854157
60173410220853673
s1822102208528
700127011020853671109
RPM,139411020853776132148
55155711020853671
˚C,1642110308321166211020854157
60173411020853673
s1822110208528
fluorescenční1325808085204079118142178207239274314346386403
spektrofotometr12798880852868105139165188227249288312351410446471494
cyklická228416070853167101119136169202237
amplifikace253616070853493134151168190209242278310345
48–60332515330853674111150188
h3528153308538
prion35161006085406481121160
negativní347812300853975116150174191226266283
výsledek34881310085347098116152193229263